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技術(shù)資料

【感官+】基于電子鼻、氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)結(jié)合感官評價優(yōu)化發(fā)酵刀板香復(fù)合菌種
發(fā)酵刀板香是徽派傳統(tǒng)美食之一,以其色、香、味、形俱佳而備受青睞,主要包括生肉制備(如分割、清洗)、鹽腌、脫鹽和干燥(或輕度發(fā)酵)。傳統(tǒng)的臘肉制作方法需要經(jīng)過漫長的風(fēng)干和貯藏過程,不僅費時費力,而且有可能在制作過程中遭受自然因素的影響,如氣溫、濕度等導(dǎo)致產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定。

本試驗采用6組不同配比的復(fù)合微生物發(fā)酵劑對刀板香進行發(fā)酵,使用電子鼻、頂空固相微萃取結(jié)合氣相色譜‐質(zhì)譜(GC‐MS)技術(shù)以及感官分析等方法,對其品質(zhì)及其揮發(fā)性風(fēng)味成分等指標進行檢測分析,以確定最佳配比,以期為徽派臘肉發(fā)酵刀板香提供更好的質(zhì)量保證,使其更好地適應(yīng)市場需求,以期進一步推動發(fā)酵刀板香加工技術(shù)的發(fā)展。 

01 材料與方法

1.1 材料與儀器
豬背部五花肉、鹽、白酒、白糖、彎曲乳桿菌WQ、木糖葡萄球菌MT.S.14菌株、MRS培養(yǎng)基、MSA培養(yǎng)基、2,4,6‐三甲基吡啶(分析純);電子分析天平、色彩色差計、氣質(zhì)聯(lián)用儀、電子鼻分析儀、萃取頭(配套固相微萃取手動進樣手柄)。

1.2 樣品制備
本試驗共分為7組。各組菌種添加量及其配比如表1所示。
表1

復(fù)合發(fā)酵劑制備:將彎曲乳桿菌WQ和木糖葡萄球菌MT.S.14活化三代,以1%的接種量分別接種到 MRS培養(yǎng)基和MSA培養(yǎng)基中37℃培養(yǎng)12 h,8 000×g 離心5 min后,將兩種菌種按照濃度配比進行混合,用 無菌生理鹽水洗2~3次,收集菌體備用。

刀板香制作工藝:選用肥瘦均勻的豬背部五花肉,將整片豬背肉切分成40 cm×15 cm的長條,在低溫環(huán)境下使用8%鹽、2%白酒和1.5%白糖進行腌制,腌制 15 d后,將復(fù)合發(fā)酵劑使用注射方式接種到樣品中,進行晾曬和發(fā)酵。發(fā)酵條件為25℃發(fā)酵7 d,成熟后放置于4℃保存。

1.3  色差測定
采用色彩色差計對成熟的樣品進行色度值的客觀儀器分析,其結(jié)果以CIE L*a*b*系統(tǒng)表示。L*值表示 亮度;a*值表示紅綠偏向;b*值表示黃藍偏向。將刀板 香切成2 cm薄片,用聚乙烯薄膜將背側(cè)面壓平,然后進行測定。每個樣品純瘦肉、純肥肉各取2片,每一片測3個點,共6個重復(fù),取其平均值。

1.4 電子鼻分析
稱2 g樣品置于頂空瓶中,置于60℃恒溫水浴平衡30 min,上機檢測。電子鼻設(shè)置參數(shù):檢測時間150 s,采集周期1 s, 清洗時間120 s,預(yù)進樣時間5 s,進樣流量900 mL/min, 載氣流速150 mL/min。每個樣品平行測定2次。用 WINMUSTER軟件對數(shù)據(jù)進行處理,選擇145 s處的信號進行進一步分析。PEN3型電子鼻傳感器由10種金屬氧化物傳導(dǎo)陣列構(gòu)成,不同傳感器性能描述如表2所示。
表2

1.5 揮發(fā)性成分分析
準確稱取4 g刀板香樣品,切碎后放置于頂空進樣瓶中。加入10μL 2,4,6‐三甲基吡啶(121.18μg/mL) 作為標準品,放置于60℃水浴鍋中預(yù)熱30 min。將固相微萃取(SPME)萃取針插入頂空瓶中萃取30 min,于250℃下解吸5 min。

1.6 感官評價
采用感官評分法對發(fā)酵刀板香樣品進行感官評價,感官評價標準如表3所示。
表3

20名經(jīng)過培訓(xùn)的評估人員,按照表3對發(fā)酵刀板香樣品進行感官評定試驗。感官分析前,專家組成員接受專業(yè)的感官評價培訓(xùn)。具體處理如下:將刀板香切成4 ~ 5 mm切片在蒸箱(150℃)內(nèi)蒸20 min,蒸熟后分別盛于白色無味紙盤中發(fā)給每位評價人員,從臘肉的準備到送達評定人員進行評定時間隔不超過1 min,嗅聞前紙盤上用保鮮膜封好防止氣味流失。要求評定人員先看并嗅聞樣品,然后食用。在表格內(nèi)對每個指標分別打分作出評定,嗅聞2個樣品間必須間隔 30 s以上。

試驗采用10分制量化加權(quán)評分法,分別對產(chǎn)品的氣味、滋味、色澤、口感、組織狀態(tài)5項指標進行評定,確定產(chǎn)品整體可接受性。根據(jù)刀板香產(chǎn)品感官品質(zhì)的不同要求,為各項指標賦予了不同的權(quán)重,其中氣味和滋味各占0.3,色澤占0.2,口感和組織狀態(tài)各占0.1。最終根據(jù)評分結(jié)果確定產(chǎn)品的整體可接受性。

02 結(jié)果與討論 

2.1 感官評價分析
7組發(fā)酵刀板香的感官評價雷達圖如圖4所示。
圖1

2.2 色差結(jié)果
不同組別發(fā)酵刀板香的色澤的分析結(jié)果如表4所示。
由表4可知,與CK組相比,使用復(fù)合發(fā)酵劑發(fā)酵的刀板香在瘦肉和肥肉中的色澤表現(xiàn)出一定的變化。
表4

2.3 電子鼻氣味分析
為更直觀地比較和分析不同配比的復(fù)合菌種發(fā)酵刀板香的香氣特征,通過繪制雷達圖來展示7組刀板香樣品在10個不同傳感器下的響應(yīng)強度峰值,結(jié)果如圖1所示。由圖1可知,樣品中的揮發(fā)性風(fēng)味成分在氮氧化合物、無機硫化物、有機硫化物、甲基類和醇類方面具有顯著的響應(yīng)能力。這意味著這些化合物在刀板香樣品中起重要的風(fēng)味貢獻作用,并且對于感知其風(fēng)味特征至關(guān)重要。通過觀察傳感器信號響應(yīng)的強弱,可以初步判斷樣品之間的氣味物質(zhì)存在差異。
圖2
采用主成分分析(PCA)進一步對電子鼻的檢測結(jié)果深入分析,結(jié)果如圖2所示。由圖2可知結(jié)果可信,可以很好地代表樣品的結(jié)果。圖示表明CK和A1的風(fēng)味差異不大,而其他5個樣品與CK組表現(xiàn)出明顯的風(fēng)味特征差異。同時,發(fā)現(xiàn)A組和B組在氣味物質(zhì)上存在顯著差異;在B組中,B1、B2和B3在氣味特征上也相距較大。B1組與CK組距離最遠,兩組風(fēng)味差異最大。

2.4 揮發(fā)性物質(zhì)分析
使用GC‐MS測定不同配比的復(fù)合菌種發(fā)酵刀板 香的揮發(fā)性化合物。GC‐MS鑒定的揮發(fā)性化合物如表5所示。
表5
續(xù)表5
續(xù)表5-2
由表5可知,在不同配比的復(fù)合菌種發(fā)酵刀板香中共檢測到66種揮發(fā)性化合物,包括醛類10種、酮類 9種、醇類9種、酸類6種、酯類5種、烯烴類4種、烷烴類10種、硫醚類3種和其他10種。

2.5 聚類分析
使用歐氏距離作為度量標準進行的聚類分析結(jié)果如圖3所示。圖3顯示了在不同配比復(fù)合菌種條件下發(fā)酵刀板香的香氣特征的變化規(guī)律。聚類分析熱圖的橫軸表示不同的配比復(fù)合菌種組別,縱軸表示揮發(fā)性物質(zhì)的種類。
圖3

在熱圖中,顏色的深淺反映了樣品之間的含量的多少,相似的樣品會聚集在一起形成簇。圖注中的行組別表示樣品中揮發(fā)性化合物的類別。由圖3可知,與CK組相比,A組和B組(添加復(fù)合菌種的組別)增強了醛類、醇類、酸類等揮發(fā)性物質(zhì),降低了硫醚類的物質(zhì)含量。其中B1組顯著增加了己醛、庚醛、壬醛、辛醛、1‐辛烯‐3醇、丙酮,己酸乙酯的含量,B2組顯著提高了2‐丙烯醛、(E)‐2‐辛烯醛的含量,這些物質(zhì)對發(fā)酵肉類的風(fēng)味產(chǎn)生起到重要作用,同時在所有樣品中,B1組的醛類、醇類等物質(zhì)含量較高,所呈現(xiàn)的風(fēng)味效果最好。

03 結(jié)論

本研究通過對復(fù)合菌種添加量和添加比例的優(yōu)化,最終發(fā)現(xiàn)添加比例為彎曲乳桿菌WQ∶木糖葡萄球菌MT.S.14=1∶3、添加量為107CFU/g的復(fù)合菌種更適合用作發(fā)酵刀板香。本研究的結(jié)果將豐富發(fā)酵刀板香高效標準化生產(chǎn)的理論框架,為更準確地開發(fā)風(fēng)味增強型復(fù)合發(fā)酵劑提供參考,并有助于提高傳統(tǒng)發(fā)酵刀板香的風(fēng)味質(zhì)量。

參考文獻:馬瀅,潘道東,張昊,等.基于電子鼻、氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)結(jié)合感官評價優(yōu)化發(fā)酵刀板香復(fù)合菌種[J].食品研究與開發(fā),2024,45(23):39‐48.
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